梅毒实验的困惑,真阳性 or 假阳性?

  

  作者:六盘水市人民医院  浮星 燕子

  案例回顾

  患者李某,男性,45岁,因下体不适一月,生殖器红肿不适,就诊于皮肤科门诊。半年前因淋病使用卓青治疗,后病情好转。患者自述离异,并有冶游史,其余不详。实验室检查中乙肝标志物(ELISA)阴性,HIV抗体(ELISA)阴性,甲肝抗体(ELISA)阴性,丙肝抗体(ELISA)阴性,戊肝抗体(ELISA)阴性。而运用不同方法检测梅毒抗体时,出现了不寻常的结果。其余未查。

  下图是梅毒抗体检测过程:

  

  下图是检测结果:

  

  下图是三个厂家的金标试纸条:

  

  下图是TPPA结果:

  

  那么,该患者TPPA究竟是真阳性还是假阳性呢?

  

  知识回顾:

  人体感染梅毒后会产生2种抗体,一类是对类脂的抗体,该抗体与从牛心中提取的心磷脂在体外可发生抗原抗体反应,该抗体无特异性;另一类为抗梅毒螺旋体的特异性抗体,此抗体由病原体产生。感染后大约2周即可检出抗体。RPR试验检测的是前者,TPPA、ELISA检测的是后者。

  梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)是使用纯化的梅毒螺旋体(N ichols株)抗原致敏明胶粒子,致敏粒子与待检血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合,产生肉眼可见的凝集。

  1、其敏感性和特异性高于RPR或者TRUST,但是操作复杂,试剂昂贵,结果判读依靠目测,难以自动化受到主观因素的影响,无法用于大规模标本的筛查有定性和定量(抗体滴度)两种结果报告方式。

  2、不能用做疗效观察指标;可用做梅毒初筛,确认实验,特异性好于TP-ELISA。

  3.提示既往感染或者现症感染。

  ELISA法测定梅毒螺旋体抗体是双抗原夹心法的原理,将高纯度梅毒螺旋体(TP)特异抗原包被于微量反应孔中,加入标本和已标记TP抗原,形成抗原-抗体-酶标记的TP抗原夹心复合物,再加显色液(过氧化脲/TMB),产生颜色反应,显色强度与TP抗体水平成正比。

  1、敏感性和特异性均高于RPR或者TRUST,但是不能用做疗效观察指标。

  2、对于孕妇和老年人群,自身免疫性疾病等的假阳性较高。

  3、既往感染或者现症感染。

  4、IgM抗体不能通过胎盘传播到婴儿。IgG类抗体可以通过胎盘传播到婴儿。

  RPR试验是以心磷脂加入活性炭组成的复合物为抗原,结果判断有定性和定量两种方式。阴性:呈黑色均匀分散。阳性:出现黑色凝集块,根据凝集块大小记录1+~4+。

  分析讨论

  1、标本经过了ELISA复检,可以排除人为和仪器误差导致的假阴性。

  2、TP-ELISA是利用基因工程技术,重组表达15kD、17kD、45kD、47kD三种蛋白,制备的梅毒抗体检测试剂盒。此例患者可能有一些非主要梅毒抗原产生的抗体,并不针对这四种蛋白。

  3、该患者可能存在针对这四种蛋白的抗体,但量极少,以至于不能参与ELISA的反应。

  4、患者可能采取服用免疫球蛋白血液制剂等治疗方法使TPPA阳性。

  5、患者可能患有基础疾病使机体释放诱导产生抗类脂抗体与抗TP的交叉抗原或体内有口腔、皮肤、肠道螺旋体共生,诱导产生特异抗原的交叉反应抗体。

  处置

  1、TPPA试验中,对未致敏粒子和致敏粒子均显示(±)以上凝集的样品,需要用未致敏粒子对血清吸收后再试验。

  2、积极与临床、患者沟通,寻找其它诊断依据。

  3、动态检测患者梅毒抗体,有条件的可考虑做梅毒螺旋体核酸检测、荧光梅毒螺旋体吸附试验等进一步试验。

  总结

  梅毒血清学检查是诊断梅毒的重要手段之一,但不是唯一手段。梅毒的诊断,除依据检验结果外,更重要的依据是详细了解患者的生活史和既往病史,以及其他详细的体查。

  遇到特殊情况需与临床医师沟通,有助于他们综合分析后慎重做出判断。以便更好的为病人服务。

  【参考文献】

  1、李韶深, 焦春梅, 刘春莉, 等. 4例梅毒感染病例TP—ELISA阴性的报告[J]. 现代检验医学杂志, 2013, 28(3):163-163.

  2、丁静, 王泉, 王庆国. RPR、TP-ELISA、TPPA试验在梅毒诊断中的应用评价[J]. 国际检验医学杂志, 2016(7):997-998.

  3、宁云云. 5种血清学方法检测梅毒螺旋体抗体的评价[J]. 中国实用医药, 2016(7):20-21.

  4、张华荣, 廖莉, 张一,等. 一例梅毒螺旋体抗体颗粒凝集吸收试验假阳性的原因分析[J]. 旅行医学科学, 2005, 11(2):30-31.

  5、WS/T 491-2016, 梅毒非特异性抗体检测操作指南[S].

  6、WS 273-2018, 梅毒诊断[S].

  来源:检验医学网

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