审核：吴洪巧 (山东大学附属济南市中心医院)
SIFIC官微科普团队微生物及检验小组
今年12月1日是第29个世界艾滋病日。截至2015年底，中国发现现存活的艾滋病病毒感染者共计57.7万人，经测算估计全国人群总感染率0.06%，即每1万人中有6人“染艾”，仍有32.1%感染者未被发现。
艾滋病患者早期无异常症状，常常被人们所忽略。往往发现症状的时候，艾滋病就已经到了晚期，治疗已经极为不容易。所以，在感染早期及时的进行艾滋病检测，是一项很重要的工作。
那么如何发现艾滋病感染者，艾滋病的检测方法有哪些呢？
艾滋病诊断
一、急性期
诊断标准：病人近期内有流行病学史和临床表现，结合实验室HIV抗体由阴性转为阳性即可诊断，或仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性即可诊断。
80%左右HIV感染者感染后6周初筛试验可检出抗体，几乎100%感染者12周后可检出抗体，只有极少数患者在感染后3个月内或6个月后才检出。
急性期通常发生在初次感染HIV后2～4周。部分感染者出现HIV病毒血症和免疫系统急性损伤所产生的临床症状。大多数患者临床症状轻微，持续1～3周后缓解。临床表现以发热最为常见，可伴有咽痛、盗汗、恶心、呕吐、腹泻、皮疹、关节疼痛、淋巴结肿大及神经系统症状。
二、无症状期
诊断标准：有流行病学史，结合HIV抗体阳性即可诊断，或仅实验室检查HIV抗体阳性即可诊断。
可从急性期进入无症状期，或无明显的急性期症状而直接进入此期。此期持续时间一般为6～8年。其时间长短与感染病毒的数量和型别、感染途径、机体免疫状况的个体差异、营养条件及生活习惯等因素有关。
三、艾滋病期
诊断标准：有流行病学史、实验室检查HIV抗体阳性，加下述各项中的任何一项，即可诊断为艾滋病。或者HIV抗体阳性，而CD4＋T淋巴细胞数
（1）原因不明的持续不规则发热38℃以上，>1个月；
（2）慢性腹泻次数多于3次/日，>1个月；
（3）6个月之内体重下降10%以上；
（4）反复发作的口腔白念珠菌感染；
（5）反复发作的单纯疱疹病毒感染或带状疱疹病毒感染；
（6）肺孢子菌肺炎（PCP）；
（7）反复发生的细菌性肺炎；
（8）活动性结核或非结核分枝杆菌病；
（9）深部真菌感染；
（10）中枢神经系统占位性病变；
（11）中青年人出现痴呆；
（12）活动性巨细胞病毒感染；
（13）弓形虫脑病；
（14）青霉菌感染；
（15）反复发生的败血症；
（16）皮肤黏膜或内脏的卡波济肉瘤、淋巴瘤。
机体免疫功能检查
主要是中度以上细胞免疫缺陷包括：CD4+T淋巴细胞耗竭，外周血淋巴细胞显著减少，CD4
艾滋病检测
一、检测时间
艾滋病检测的最佳检测时间，不良性行为等高危行为后，一般需要2-4周时间就可以检测出艾滋病HIV抗体。时间越往后艾滋病急性期，检测的准确性就越高，绝大多数被HIV感染的人，在4周后就能产生足够多的抗体，这个数量能够满足使用目前的HIV抗体测试方法检测出HIV阳性。如果不良性行为后3个月查的是阴性，6个月后再查，6个月的结果也是阴性就可以排除您是艾治病了。
二、检测方法
1、抗体检测
主要有酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫荧光试验（IFA）。ELISA用去污剂裂解HIV或感染细胞液提取物作抗原，IFA用感染细胞涂片作抗原进行抗体检测，如果发现阳性标本应重复一次。为防止假阳性，可做Westernblot（WB，蛋白印迹法）进一步确证。
WB法是用聚丙烯酰胺凝胶电泳将HIV蛋白进行分离，再经传移电泳将不同蛋白条带转移于硝酸纤维膜上，加入病人血清孵育后，用抗人球蛋白酶标抗体染色，就能测出针对不同结构蛋白抗体，如抗gp120、gp41、P24抗体，特异性较高。
快速检测法，也称为金标法，也是抗体检测的一种方法，根据免疫层析法的原理，用于HIV抗体检测的定性检测。
抗体通常是在感染后3～8周能够被检测出来。目前，大多应用双抗原夹心法，这种方法具有很好的灵敏性和特异性。抗体检测由初筛和确认试验组成，初筛试验呈阳性的必须进行确认试验。酶联免疫吸附分析(ELISA)方法有一定的灵敏度，且操作简单、快速，适合对大量样品的检测。因此艾滋病急性期，是目前临床通用的初筛检测方法。
国际上有3种确认试验方法，包括免疫印迹试验、条带免疫试验及免疫荧光试验，目前以免疫印迹试验最为常用。
2、抗体抗原检测
酶联免疫吸附试验
ELISA法的基本原理是免疫反应物通过化学或免疫学的方法形成酶结合物，酶结合物能与待检样品中相应的抗原或抗体结合成为免疫复合物,然后加入酶底物,经酶的催化或水解作用,无色底物产生颜色,用肉眼、分光光度计观察结果。
免疫印迹试验
免疫印迹试验主要用于确认试验，基本原理是HIV全病毒抗原经过SDS?PAGE电泳,将分子量大小不等的蛋白带分离开来,然后再把这些已经分离的不同蛋白带电转移到硝酸纤维素膜上。将此膜切割成条状,每一条硝酸纤维素膜上均含有经电泳分离过的HIV病毒抗原。将待检血清样品用稀释液稀释成1/100,再把它直接加到硝酸纤维素膜上,恒温震荡,使其充分接触反应,血清中若含有抗HIV抗体,就会与膜条上的抗原带相结合。加入抗人IgG酶结合物和底物后,即可使有反应的抗原抗体结合带呈现紫褐色,根据出现条带情况判定结果。有报告说，免疫印迹试验的特异性不是很好, 有大约2%的假阳性率，但免疫印迹试验依然是目前最常用的HIV确认试验。
免疫荧光试验(IFA)
基本原理为应用H?9或HUT78培养细胞作为载体,用HIV感染细胞,该细胞内就会含有HIV抗原,将HIV感染的淋巴细胞涂于玻片上,固定，制备为抗原片,加入待检血清，待检血清中的抗 HIV抗体与抗原结合后,再与荧光素标记的抗人Ig结合,在荧光显微镜下可见到细胞内有黄绿色荧光。
3、快速检测
其特点是方便、快速（10分钟出结果）、准确、是筛查艾滋病患者的首选方法。
一种是血检试纸，一种是唾液试纸。唾液检测试纸只有一种美国艾威尔的唾液检测试纸，正规艾滋病检测试纸生产批号均可以国家食品药物监督管理局查询，目前也没有出现过艾滋病试纸的假货之类的情况出现。
胶体金法（金标）人类免疫缺陷病毒（HIV 1/2）抗体检测试剂盒是应用胶体金免疫层析技术建立的灵敏、特异、操作简便的一步法HIV 1/2抗体定性检测试剂。用于定性检测人血清或血浆样本中的HIV 1型和HIV 2型的特异性抗体，以辅助诊断HIV感染，其阳性结果需用免疫印迹法确认。
结语
艾滋病不仅仅给社会，给家庭，都带来沉重的经济负担和社会问题，要及早发现艾滋病，及早治疗，杜绝将病毒再次传给他人。
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